ips听课记录

• 2020-05-24

基于ipsc的疾病模型和药物筛选流程

https://www.bilibili.com/video/BV1Ea4y1t7rt?from=search&seid=17381385880816268803

全能

专能，msc

多能干细胞，ipsc、esc，可分化为除胎盘以外的所有细胞

1981年，鼠mESC

1998年，人hESC，从卵母细胞，来源和数量限制了临床应用

2006年，ipsc，山中伸弥，腺病毒感染鼠成纤维细胞、yamanaka四因子，oct4、sox4、klf4、cmyc

2012年，诺贝尓奖，John Gurdon，yananaka

2014年，日本开始临床应用。异体ipsc，所以可以做ipsc库

2019年底，nih，第一次临床实验，血细胞-视网膜细胞，老年红斑病变

在疾病模型构建、药物筛选中的应用

之前使用动物模型，广泛使用。优点、体内模型；缺点、无法完全模拟人类疾病特征，如发育等

ipsc-心肌细胞、肝细胞、神经细胞等比较难以获得的

类器官-扩展了ipsc的应用

缺陷：体外模型，病人本身背景复杂、可供分化的细胞类型仍有限制

是动物模型的一个补充

样本获取-重编程培养-分化及模型建立（2d，类器官）-【表型鉴定】-疾病研究和药物筛选

重编程-成纤维细胞、pbmc、rpe、mnc-病毒、质粒、mrna、蛋白-4-6周

小分子诱导重编程，清华大学DING Sheng；北大denghongkui

TOCRIS小分子

培养-有滋养层（含血清DMEM+FBS+添加剂+feeder+bFGF/LIF、无血清Knockout DMEM+KSR+添加剂+bFGF/LIF）-无滋养层（无血清体系MEF conditioned media+bFGF/Stem Flex,thermo+mTeSR,stemcell；Xeno-free无异源成分E8&E8 flex，thermo/TeSR2，stemcell；animal free无动物源成分CTS E8，thermo/Tesr-E8，stemcell）

ipsc鉴定-表型鉴定，（1）抗体；（2）流式检测；（3）抗体芯片-同时检测15marker，24孔板的一个孔

ipsc鉴定-功能检测，分化鉴定，三胚层分化

多能干细胞分化信号通路图

干细胞分化试剂盒（图）

疾病模型研究

类器官模型，3d培养，填补2d模型到动物模型的空缺

小分子和因子诱导、细胞外基质（基质胶，cultrex）

Person：hans clevers

Bio-Techne类器官培养产品