ips听课记录
- 2020-05-24
基于ipsc的疾病模型和药物筛选流程
https://www.bilibili.com/video/BV1Ea4y1t7rt?from=search&seid=17381385880816268803
全能
专能,msc
多能干细胞,ipsc、esc,可分化为除胎盘以外的所有细胞
1981年,鼠mESC
1998年,人hESC,从卵母细胞,来源和数量限制了临床应用
2006年,ipsc,山中伸弥,腺病毒感染鼠成纤维细胞、yamanaka四因子,oct4、sox4、klf4、cmyc
2012年,诺贝尓奖,John Gurdon,yananaka
2014年,日本开始临床应用。异体ipsc,所以可以做ipsc库
2019年底,nih,第一次临床实验,血细胞-视网膜细胞,老年红斑病变
在疾病模型构建、药物筛选中的应用
之前使用动物模型,广泛使用。优点、体内模型;缺点、无法完全模拟人类疾病特征,如发育等
ipsc-心肌细胞、肝细胞、神经细胞等比较难以获得的
类器官-扩展了ipsc的应用
缺陷:体外模型,病人本身背景复杂、可供分化的细胞类型仍有限制
是动物模型的一个补充
样本获取-重编程培养-分化及模型建立(2d,类器官)-【表型鉴定】-疾病研究和药物筛选
重编程-成纤维细胞、pbmc、rpe、mnc-病毒、质粒、mrna、蛋白-4-6周
小分子诱导重编程,清华大学DING Sheng;北大denghongkui
TOCRIS小分子
培养-有滋养层(含血清DMEM+FBS+添加剂+feeder+bFGF/LIF、无血清Knockout DMEM+KSR+添加剂+bFGF/LIF)-无滋养层(无血清体系MEF conditioned media+bFGF/Stem Flex,thermo+mTeSR,stemcell;Xeno-free无异源成分E8&E8 flex,thermo/TeSR2,stemcell;animal free无动物源成分CTS E8,thermo/Tesr-E8,stemcell)
ipsc鉴定-表型鉴定,(1)抗体;(2)流式检测;(3)抗体芯片-同时检测15marker,24孔板的一个孔
ipsc鉴定-功能检测,分化鉴定,三胚层分化
多能干细胞分化信号通路图
干细胞分化试剂盒(图)
疾病模型研究
类器官模型,3d培养,填补2d模型到动物模型的空缺
小分子和因子诱导、细胞外基质(基质胶,cultrex)
Person:hans clevers
Bio-Techne类器官培养产品